發(fā)酵液可以用離心機處理
微生物發(fā)酵和細胞培養(yǎng)的目標產物主要有菌體、胞內產物和胞外產物三類物質。
從發(fā)酵液和細胞培養(yǎng)液中提取所需的生化物質,第一步就需進行預處理,以便于固液分離,使代謝產物后續(xù)的分離純化工序順利進行。其原因有三個方面:首先,發(fā)酵液多為懸浮液,粘度大,為非牛頓型流體,不易過濾,而所需的生化物質往往只有分布在液相,才能有效地提純。并且,在有些發(fā)酵液中,菌體自溶,核酸、蛋白質及其他有機粘性物質這三類物質會造成濾液混濁、濾速極慢,必須設法增大懸浮物的顆粒直徑,提高沉降速度,以利于過濾;其次,目標產物在發(fā)酵液中的濃度通常較低;此外,發(fā)酵液的成分復雜,大量的菌絲體、菌種代謝物和剩余培養(yǎng)基會對提取造成很大的影響。所以,對發(fā)酵液進行適當的預處理,從而分離細胞、菌體和其他懸浮顆粒(如細胞碎片、核酸以及蛋白質的沉淀物),并除去部分可溶性雜質和改變發(fā)酵液的過濾性能,是生化物質分離純化過程中必不可少的首要步驟。
預處理方法要根據發(fā)酵產品、所用菌種和發(fā)酵液特性來選擇。大多數發(fā)酵產品存于發(fā)酵液中,少數存于菌體中,而發(fā)酵液和菌體中都有產物存在的情形也比較常見。如果目的產物是胞外產物,則通過離心或過濾實現(xiàn)固液分離,使其轉入液相;而對于胞內產物而言,收集細胞是預處理的首要一步。細胞經破碎或整體細胞萃取使目的產物釋放,轉入液相,再進行細胞碎片的分離。如果所需的產物為細胞,離心或過濾所得固相經干燥等過程就可得到菌體。
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